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?人血吸蟲ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟

發(fā)表時(shí)間:2025-04-10 15:51

人血吸蟲ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟:


加樣:在反應(yīng)孔中加入待測樣本,每個(gè)樣本設(shè)立一個(gè)復(fù)孔以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí),設(shè)立陰性對(duì)照孔和陽性對(duì)照孔,以監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的有效性和特異性。注意操作時(shí)應(yīng)避免交叉污染,加樣槍頭需一次性使用。


溫育:將加樣后的反應(yīng)板置于37℃恒溫箱中溫育,時(shí)間通常為30分鐘至1小時(shí),具體根據(jù)試劑盒說明書操作。溫育過程中,應(yīng)確保反應(yīng)板密封良好,避免蒸發(fā)影響結(jié)果。


洗板:溫育結(jié)束后,取出反應(yīng)板,輕輕甩掉孔內(nèi)液體,用洗滌液反復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需徹底拍干,以去除未結(jié)合的成分。


加酶標(biāo)抗體:在洗滌后的反應(yīng)孔中加入酶標(biāo)抗體,同樣設(shè)立復(fù)孔。加樣后,再次將反應(yīng)板置于37℃恒溫箱中溫育,時(shí)間一般為30分鐘。


顯色:溫育結(jié)束后,取出反應(yīng)板,加入顯色劑。在室溫下避光顯色10-15分鐘,期間注意觀察顏色變化,避免顯色過度。


10. 終止反應(yīng):當(dāng)陽性對(duì)照孔顏色適中時(shí),加入終止液終止顯色反應(yīng)。此時(shí),反應(yīng)孔中的顏色將由藍(lán)色變?yōu)辄S色。


11. 結(jié)果判定:在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi),使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定各孔的吸光度值。根據(jù)陰性對(duì)照孔和陽性對(duì)照孔的吸光度值,結(jié)合樣本的吸光度值,判斷樣本是否為人血吸蟲陽性。光度值,判斷樣本是否為人血吸蟲陽性。


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