產å“介紹
細胞å稱:人膽管細胞型è‚癌細胞
形態(tà i)特性:上皮細胞樣
生長特性:貼å£ç”Ÿé•·
特å¾ç‰¹æ€§ï¼š HCCC-9810ç´°èƒžæ ªæºè‡ªä¸€ä½å¥³æ€§è‚膽管細胞癌患者。 HCCC-9810ç´°èƒžå‘ˆä¸Šçš®ç´°èƒžæ¨£ï¼ŒæŸ“è‰²é«”æ¨¡å¼æ•¸(shù)為71,但染色體數(shù)ç›®å¯ä»¥åœ¨22-117的范åœå…§è®Šå‹•。å€å¢žæ™‚間為20.4å°æ™‚。 AFP,CEAå’ŒCA19-9çš„åˆ†æ³Œæ°´å¹³ä½Žï¼Œåœ¨è£¸é¼ ä¸çš„æˆç˜¤çŽ‡ç‚º20%。
培養(yÇŽng)æ¢ä»¶ï¼š RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法:消化3-5分é˜ã€‚1:
2。3天內å¯é•·æ»¿ã€‚
傳代情æ³ï¼š PN
å‡å˜æ¢ä»¶ï¼šå®Œå…¨åŸ¹é¤Š(yÇŽng)基+8%DMSO
產å“å稱 | 人膽管細胞型è‚癌細胞 |
英文簡稱 | HCCC-9810 |
狀態(tà i) | è²¼å£ |
細胞冷å‡ä¿å˜ï¼š
1.å‡å˜æ¶²ï¼š92%完全培養(yÇŽng)基+8%DMSO(å¯ä»¥æ ¹æ“š(jù)實驗室æ¢ä»¶è‡ªè¡Œé¸æ“‡ï¼‰
2.陿º«æ¥é©Ÿï¼š4度10min,-20度2h,-80éŽå¤œåŽæ¶²æ°®ä¿å˜ã€‚
細胞培養(yÇŽng)çš„æ“作æ¥é©Ÿï¼š
1.人膽管細胞型è‚癌細胞å¸èµ°ç”¨äºŽåŸ¹é¤Š(yÇŽng)åŸºï¼ŒåŠ å…¥3-5mL PBSåŽè¼•輕晃動培養(yÇŽng)瓶潤洗細胞;
2.å¸å¹²å‡ˆPBSåŽåŠ å…¥1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTAï¼Œè¼•è¼•æ–æ™ƒåŸ¹é¤Š(yÇŽng)皿使胰酶浸沒細胞表é¢ï¼ŒåŸ¹é¤Š(yÇŽng)瓶放37度培養(yÇŽng)箱消化;
(細胞å°äºŽæ¶ˆåŒ–æ¯”è¼ƒæ•æ„Ÿï¼Œæ¶ˆåŒ–éŽåº¦æœƒåš´é‡å½±éŸ¿ç´°èƒžç‹€æ…‹(tà i),導致細胞傳代æ»äº¡æ¼‚浮或者傳代åŽä¸é•·ã€‚細胞消化到細胞間隙變大但未脫è½ï¼Œå¯ä»¥è¼•輕å¹ä¸‹æ™‚å³å¯çµ‚æ¢ï¼Œç¦æ¢æ¶ˆåŒ–到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡é‡è¼•柔,ä¸è¦å¹å‡ºå¤§é‡æ°£æ³¡ã€‚)
3.åŠ å…¥6-8ml完全培養(yÇŽng)åŸºçµ‚æ¢æ¶ˆåŒ–,輕輕å¹ä¸‹ç´°èƒžæ··å‹»ï¼›
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,å†ç”¨æ–°é®®åŸ¹é¤Š(yÇŽng)åŸºé‡æ‡¸37度培養(yÇŽng)箱繼續(xù)培養(yÇŽng)ï¼›
傳代比例: ä¸åŒç´°èƒžç”Ÿé•·é€Ÿåº¦ä¸ä¸€ï¼Œå…·é«”傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞é©ç”¨1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞å¯ä»¥1:2傳代。