產(chÇŽn)å“介紹
ç´°(xì)胞å稱:人神經(jÄ«ng)æ¯ç´°(xì)胞瘤
形態(tà i)特性:上皮樣細(xì)胞
ç”Ÿé•·ç‰¹æ€§ï¼šè²¼å£æ‡¸æµ®æ··åˆç”Ÿé•·
特å¾ç‰¹æ€§ï¼šè©²ç´°(xì)胞系來æºäºŽ1970年建立的一神經(jÄ«ng)æ¯ç´°(xì)胞瘤患者的轉(zhuÇŽn)移骨瘤ç¶ç´°(xì)胞SK-N-SHç¶“(jÄ«ng)三次克隆åŽçš„亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 該細(xì)胞顯示ä¸ç‰æ°´å¹³çš„多巴胺-β-羥基酶活性。 SH-SY5Yç´°(xì)胞的生長密度å¯é«˜é”(dá)1X106ç´°(xì)胞/cm2ï¼Œç”Ÿé•·æˆæ‡¸æµ®å’Œè²¼å£æ··åˆç”Ÿé•·ï¼Œæœ‰çš„èšé›†æˆç´°(xì)胞å¢
培養(yÇŽng)æ¢ä»¶ï¼š DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter
傳代方法: 1:
3傳代;3-4天一次
傳代情æ³ï¼š PN8
å‡å˜æ¢ä»¶ï¼šåŸºç¤Ž(chÇ”)培養(yÇŽng)基+5%DMSO+20%FBS
產(chÇŽn)å“å稱 | 人神經(jÄ«ng)æ¯ç´°(xì)胞瘤 |
英文簡稱 | SH-SY5Y |
狀態(tà i) | è²¼å£ |
ç´°(xì)胞冷å‡ä¿å˜ï¼š
1.å‡å˜æ¶²ï¼š92%完全培養(yÇŽng)基+8%DMSO(å¯ä»¥æ ¹æ“š(jù)實驗室æ¢ä»¶è‡ªè¡Œé¸æ“‡ï¼‰
2.陿º«æ¥é©Ÿï¼š4度10min,-20度2h,-80éŽå¤œåŽæ¶²æ°®ä¿å˜ã€‚
ç´°(xì)胞培養(yÇŽng)çš„æ“作æ¥é©Ÿï¼š
1.人神經(jÄ«ng)æ¯ç´°(xì)胞瘤å¸èµ°ç”¨äºŽåŸ¹é¤Š(yÇŽng)åŸºï¼ŒåŠ å…¥3-5mL PBSåŽè¼•輕晃動培養(yÇŽng)瓶潤洗細(xì)胞;
2.å¸å¹²å‡ˆPBSåŽåŠ å…¥1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTAï¼Œè¼•è¼•æ–æ™ƒåŸ¹é¤Š(yÇŽng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表é¢ï¼ŒåŸ¹é¤Š(yÇŽng)瓶放37度培養(yÇŽng)箱消化;
(細(xì)胞å°äºŽæ¶ˆåŒ–æ¯”è¼ƒæ•æ„Ÿï¼Œæ¶ˆåŒ–éŽåº¦æœƒåš´(yán)é‡å½±éŸ¿ç´°(xì)胞狀態(tà i),導(dÇŽo)致細(xì)胞傳代æ»äº¡æ¼‚浮或者傳代åŽä¸é•·ã€‚ç´°(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫è½ï¼Œå¯ä»¥è¼•輕å¹ä¸‹æ™‚å³å¯çµ‚æ¢ï¼Œç¦æ¢æ¶ˆåŒ–到細(xì)胞完全漂浮?ï¼›é¹èš£?xì)胞時盡é‡è¼•柔,ä¸è¦å¹å‡ºå¤§é‡æ°£æ³¡ã€‚)
3.åŠ å…¥6-8ml完全培養(yÇŽng)åŸºçµ‚æ¢æ¶ˆåŒ–,輕輕å¹ä¸‹ç´°(xì)胞混勻;
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,å†ç”¨æ–°é®®åŸ¹é¤Š(yÇŽng)åŸºé‡æ‡¸37度培養(yÇŽng)箱繼續(xù)培養(yÇŽng)ï¼›
傳代比例: ä¸åŒç´°(xì)胞生長速度ä¸ä¸€ï¼Œå…·é«”傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞é©ç”¨1:3-1:4傳代,生長較慢的細(xì)胞å¯ä»¥1:2傳代。